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細(xì)胞內(nèi)鈣測(cè)定
點(diǎn)擊次數(shù):561 發(fā)布時(shí)間:2010-1-25
式中Kd為 Fura-2與Ca 結(jié)合反應(yīng)的介離常數(shù),
靜息態(tài)時(shí)[Ca ]i<0.1umol/L。[Ca ]0濃度為1~1.5mmol/L,細(xì)胞內(nèi)外[Ca ]相差104。細(xì)胞膜內(nèi)外的[Ca ]差是細(xì)胞外的Ca 進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的推動(dòng)力。
(組織細(xì)胞以12.5%胰蛋白酶消化20-30 min)
↓
加Triton X 100 100μl
↓
↓
340nm測(cè)熒光(zui大值Fmax)
↓
↓
冰浴 2 min
↓
加EGTA 80μl(
↓
水浴5 min → 冰浴 5 min
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380 nm 測(cè)定熒光(zui小值Fmin)