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當(dāng)新鮮空氣成為奢侈品?——淺談GC-MS在呼吸氣檢測中的應(yīng)用

閱讀:606      發(fā)布時(shí)間:2019-12-3
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近日,一則“新德里空氣污染嚴(yán)重,民眾花30元吸氧15分鐘”的新聞引起公眾關(guān)注。看似略顯荒謬,卻也發(fā)人深省。據(jù)報(bào)道,印度新德里空氣重度污染,多地PM2.5數(shù)值超過999,“爆表”程度相當(dāng)于當(dāng)?shù)厮那f人每人每天吸33.2根香煙,對呼吸道的損傷可見一斑。

 

近幾年,霧霾話題總能常居“熱搜”,一方面是環(huán)境問題嚴(yán)峻,另一方面,大家開始越來越重視自身健康。談癌色變的今天,人們愈發(fā)意識到自己的健康與一呼一吸息息相關(guān),開始大量購買防霾口罩,空氣凈化器、新風(fēng)系統(tǒng)也成為家裝*。關(guān)注每口吸入空氣的你又可知道:每一下呼出氣也可以作為疾病初篩和診斷的依據(jù)?

 

實(shí)施慢性呼吸系統(tǒng)疾病防治行動

 

此前國務(wù)yuan印發(fā)《國務(wù)yuan 關(guān)于實(shí)施健康中國行動的意見》明確指出:針對心腦血管疾病、癌癥、慢性呼吸系統(tǒng)疾病、糖尿病四類慢性病需要加強(qiáng)防控。針對呼吸系統(tǒng)疾病提出實(shí)施慢性呼吸系統(tǒng)疾病防治行動,引導(dǎo)重點(diǎn)人群早期發(fā)現(xiàn)疾病,控制危險(xiǎn)因素,預(yù)防疾病發(fā)生發(fā)展。對于呼吸系統(tǒng)的疾病,如何快速發(fā)現(xiàn)、及早治療,也成為了相關(guān)研究需要突破的方向。

 

- 新型無創(chuàng)檢測方法 -

如今科學(xué)家們帶給了我們一種新型的檢測方法,只需要簡單的呼吸就能夠進(jìn)行疾病初篩并提供診斷的依據(jù)。這就是今天我們要介紹的呼吸氣檢測,一種無創(chuàng)傷的、簡便快捷的診斷方式,可作為診斷呼吸系統(tǒng)疾病(如:哮喘)的方法。對人體肺泡氣中痕量的VOCs等小分子代謝物進(jìn)行的代謝組學(xué)研究,目前已在肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、乳xian癌、糖尿病等重大疾病的早期篩查和研究中有所應(yīng)用,國外也有了相關(guān)應(yīng)用的報(bào)道。

英國癌癥研究院(Cancer Research UK)和英國生物技術(shù)公司(Owlstone Medical)就“從癌癥患者的呼吸中尋找潛在的生物標(biāo)記物”開始了臨床試驗(yàn)。呼出氣中VOCs極低的濃度,對實(shí)驗(yàn)設(shè)備(前處理富集和質(zhì)譜分析)的靈敏度提出了極大的考驗(yàn)。

 

具體方法

首先,Owlstone Medical與呼吸組學(xué)領(lǐng)域?qū)<液献鏖_發(fā)的一種*非侵入性的呼吸檢測儀ReCIVA Breath Sampler(下圖),通過軟件控制采樣泵開關(guān)時(shí)間,結(jié)合Breath Biopsy Cartridge(呼吸氣吸附管),從而對測試者的呼出氣組分進(jìn)行有效富集。

Owlstone Medical的呼吸氣采樣器

ReCIVA Breath Sampler

 

收集完成后,研究人員通過MarkesTD100-xr熱脫附儀對呼吸氣VOCs解析進(jìn)樣,采用Thermo Scientific™ GC-Orbitrap/MS(高分辨靜電場軌道阱氣質(zhì)聯(lián)用儀)進(jìn)行分析。通過Thermo Scientific™ TraceFinder4.1對數(shù)據(jù)自動進(jìn)行解卷積和譜庫檢索處理,并結(jié)合高分辨過濾分值(HRF Score)與保留指數(shù)(RI)進(jìn)一步確證質(zhì)譜定性結(jié)果。

賽默飛高分辨靜電場軌道阱氣質(zhì)聯(lián)用儀與熱脫附儀聯(lián)機(jī)圖

TraceFinder4.1的高分辨數(shù)據(jù)解卷積和譜庫檢索界面

 

呼吸氣檢測中,重要的生物標(biāo)記物往往因?yàn)闈舛鹊汀①|(zhì)譜響應(yīng)信號弱,而被復(fù)雜的呼吸氣基質(zhì)干擾所淹沒。Orbitrap作為質(zhì)譜檢測器,以其高分辨率、高靈敏度著稱,同時(shí)寬線性動態(tài)范圍使得待測化合物即使處于*或極低濃度時(shí),也不會因?yàn)橘|(zhì)量精度和離子比率的改變而導(dǎo)致定性錯(cuò)誤。

 

有了全流程的分析儀器,該實(shí)驗(yàn)基于吸煙相關(guān)的生物標(biāo)記物數(shù)據(jù)庫對不同吸煙狀況人群(非吸煙者、吸煙者、戒煙者)的呼吸氣進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)二甲基呋喃、甲苯、乙苯等化合物在呼吸氣中的含量與吸煙行為有*的相關(guān)性

 

Orbitrap高分辨靜電場軌道阱氣質(zhì)聯(lián)用與呼吸氣采樣器、熱脫附儀聯(lián)用的一整套呼吸氣分析系統(tǒng),在極低濃度呼吸氣生物標(biāo)記物分析中展示出極大的優(yōu)勢。雖然呼吸活檢仍處于臨床試驗(yàn)階段,但未來可期,呼吸癌癥測試一旦成為現(xiàn)實(shí),研究將影響數(shù)百萬人的生活,通過早期癌癥篩查,有望拯救數(shù)十萬人的生命并節(jié)省超過15億美元的相關(guān)醫(yī)療費(fèi)用。一呼一吸之間,有我們對健康生活的追求,也會有我們對此的科學(xué)守護(hù)。

 

參考文獻(xiàn):

BREATH BIOPSY: Combining Thermal Desorption-Gas Chromatography with High Resolution Mass Spectrometry for Improved Sensitivity and Selectivity in Untargeted Breath Analysis, Jasper Boschmans, Cristian Cojocariu, Paul Silcock, Billy Boyle, Alexander Makarov, Max Allsworth

 

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